四環牌ME-壓力蒸汽滅菌生物指示菌片是由嗜熱脂肪桿菌（ATCC7953）芽孢和濾紙片組成。菌片回收菌量為5.0×105cfu/片～5.0×106cfu/片。生物指示菌片的抗力符合國際標準和國家標準的規定：在121℃飽和蒸汽作用下，存活時間≥3.9min，殺滅時間≤19min，D10值1.3min～1.9min。

【型號】指示菌片

【使用范圍】適用于醫療衛生機構、制藥工業和醫院制劑生產等各行業使用的121℃下排氣式壓力蒸汽滅菌器、132℃～134℃預真空或脈動真空壓力蒸汽滅菌器、小型壓力蒸汽滅菌器等滅菌效果的監測。

【使用方法】

1.使用時，將用小紙袋包裝好的生物指示菌片按要求放在標準測試包的中心或物品包的中心，置于滅菌器內最難消毒的位置，按規定的滅菌溫度和時間進行滅菌處理。檢驗同時設生物指示菌片陽性對照，陽性對照生物指示菌片放室溫下，不進行滅菌處理。

2.滅菌完畢，在無菌操作下取出小紙袋中的生物指示菌片，投放到恢復培養基溶液管中。同時將未經滅菌的生物指示菌片投入另一管恢復培養基溶液中作陽性對照。置于56℃恒溫培養箱內或配套的微型培養器內培養24h～48h觀察初步結果，無菌生長時應在第7d觀察最終結果。

【結果判定】

培養后生物指示菌片培養管中的恢復培養基溶液由紫色澄清液體變為黃色澄清液體即表示有菌生長，判定為滅菌不合格；恢復培養基溶液仍為紫色澄清液體為無菌生長；同時陽性對照生物指示菌片生長正常即恢復培養基溶液由紫色澄清液體變為黃色澄清液體，判定為滅菌合格。

【注意事項】

1.恢復培養基溶液的pH值應≥7.2但≤7.4，pH值＞7.5時，嗜熱脂肪桿菌芽孢生長不良。

2.培養溫度須在56℃～60℃之間，否則可導致嗜熱脂肪桿菌芽孢生長不良，或不能生長。

3.滅菌處理后，恢復培養基溶液顏色與壓力蒸汽滅菌前比較會變淺，呈現淺紫色，這種變化屬正常現象。

4.菌片被完全浸沒于恢復培養基溶液后，用手輕輕振搖，使菌片浸入恢復培養基溶液中，有利于存活細菌芽孢的生長。

5.用恢復培養基溶液在56℃培養時間過長（72h以上），陽性對照管中恢復培養基溶液的黃色容易消退，導致無法準確判斷結果；所以應注意每天觀察，隨時記錄培養結果。

6.本生物指示菌片應保存于4℃冰箱內。

【有效期】12個月。

【包裝規格】50片/包。

附：恢復性培養基溶液的制備

【培養基配方】胰蛋白胨10g、葡萄糖5g、可溶性淀粉1g、蒸餾水和1.6%溴甲酚紫乙醇溶液指示劑。

【配制方法】

1.用玻璃燒杯取少許蒸餾水,加入可溶性淀粉1g,加熱煮沸使其完全溶解。

2.取胰蛋白胨10g和葡萄糖5g溶解于900ml蒸餾水中，完全溶解后，加入變冷的淀粉溶液和1.6%溴甲酚紫乙醇溶液1.0ml，振搖混勻后，調節pH至7.2～7.4，補充蒸餾水至1000ml,分裝（每管5ml），置121℃壓力蒸汽滅菌20min或115℃壓力蒸汽滅菌30min。放入4℃冰箱內保存，備用。

1.6%溴甲酚紫乙醇溶液的配制，取1.6g溴甲酚紫加到98.4ml95％乙醇溶液中搖勻即可。

【注意事項】防止指示劑中乙醇揮發而使溴甲酚紫含量過高（溴甲酚紫含量過高后可抑制細菌生長）。